波多野结衣 黑人丨亚洲va国产日韩欧美精品色婷婷丨国产爽爽久久影院潘金莲丨国产玉足脚交欧美一区二区丨欧美一区二区在线丨日本免费一区二区三区激情视频丨欧美大片免费观看在线观看网站推荐丨一个本道久久综合久久88丨国产精品美女久久久久久2021丨亚洲中文欧美在线视频丨国产亚洲精品麻豆一区二区丨精品xxxxx丨人妻夜夜爽天天爽一区二区丨在线爽丨97在线成人国产在线视频丨久久22丨久久91丨农村少妇野战做爰全过程丨日韩久久免费丨秋霞无码久久久精品丨久久艹中文字幕丨懂色av一区二区三区免费看丨日本人妻巨大乳挤奶水丨中文字幕日本精品一区二区三区丨国产三级在线观看播放

豚鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞分離液說明書LDS1083

豚鼠外周血單個(gè)核細(xì)胞分離液說明書

【包裝規(guī)格】
200ml/瓶
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
A．適用儀器
zui大離心力可達(dá)1200g的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
B．耗材

【檢驗(yàn)方法】
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在20±2℃的條件下進(jìn)行。
首先根據(jù)樣本量大小，分以下幾種情況：
一、使用15ml離心管時(shí)：
情況A：血液樣本量小于 3ml時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法如下：
1.取一支15ml離心管，加入3ml分離液。
2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，400-650g，離心20-30min（注：根據(jù)血
液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時(shí)間越長，具體離心條件
需客戶自行摸索，以達(dá)到分離效果）。
3.離心后，此時(shí)離心管中由上至下分為四層。*層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個(gè)
核細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管
中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118），混勻細(xì)胞。
5. 250g，離心10min。
6.棄上清。
7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118）重懸所得細(xì)胞。
8. 250g，離心10min。
9.重復(fù)6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
情況B：血液樣本量為3-6ml時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法如下：
1.取一支15ml離心管，先加入與血液樣本等量的分離液。
2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，400-650g，離心20-30min（注：根據(jù)血
液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時(shí)間越長，具體離心條件
需客戶自行摸索，以達(dá)到分離效果，但zui大離心力不超過1000g）。
3.離心后，此時(shí)離心管中由上至下分為四層。*層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個(gè)
核細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管
中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118），混勻細(xì)胞。
5. 250g，離心10min。
6.棄上清。
7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118）重懸所得細(xì)胞。
8. 250g，離心10min。
9.重復(fù)6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
二、使用50ml離心管時(shí)：
情況A：血液樣本量為6-10ml時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法如下：
1.取一支50ml離心管，先加入與血液樣本等量的分離液。
2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，500-950g，離心20-30min（注：根據(jù)血
液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時(shí)間越長，具體離心條件
需客戶自行摸索，以達(dá)到分離效果，但zui大離心力不超過1200g）。
3.離心后，此時(shí)離心管中由上至下分為四層。*層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個(gè)
核細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管
中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118），混勻細(xì)胞。
5. 250g，離心10min。
6.棄上清。
7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118）重懸所得細(xì)胞。
  8. 250g，離心10min。
9.重復(fù)6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
情況B：血液樣本量為10-20ml時(shí)，實(shí)驗(yàn)方法如下：
1.取一支50ml離心管，先加入與血液樣本等量的分離液。
2.用吸管小心吸取血液樣本加于分離液之液面上，650-110g，離心20-30min（注：根據(jù)血
液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時(shí)間越長，具體離心條件
需客戶自行摸索，以達(dá)到分離效果，但zui大離心力不超過1200g）。
3.離心后，此時(shí)離心管中由上至下分為四層。*層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色單個(gè)
核細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層到另一15ml離心管中，向所得離心管
中加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118），混勻細(xì)胞。
5. 250g，離心10min。
6.棄上清。
7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號(hào)：2010X1118）重懸所得細(xì)胞。
8. 250g，離心10min。
9.重復(fù)6、7、8，棄上清后以0.5ml后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
【注意事項(xiàng)】
1.全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，
在取血2h內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，血液存放時(shí)間越長，細(xì)胞分離效果越差。血液放置超過6h
后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
2.本實(shí)驗(yàn)不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離
心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面
會(huì)變成毛面，影響細(xì)胞分離效果。
3.吸取過多的單個(gè)核細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的
粒細(xì)胞數(shù)量增加。
4.吸取過多的單個(gè)核細(xì)胞層上層溶液會(huì)導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。
5.如所實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低，請(qǐng)上海研謹(jǐn)以尋求幫助，具體
詳見下方生產(chǎn)企業(yè)信息。
6.當(dāng)血液樣本粘度過高需稀釋時(shí)，*稀釋方法：將血液與樣本稀釋液（產(chǎn)品編號(hào)：
2010C1119）1:1稀釋混勻備用。注：不當(dāng)?shù)南♂尫椒〞?huì)降低細(xì)胞得率及活性。如血液樣
  本經(jīng)過稀釋則分離過程中需適當(dāng)降低離心力和離心時(shí)間。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
18-25℃保存，有效期2年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
封后置常溫保存。如4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
本實(shí)驗(yàn)淋巴細(xì)胞提取率及純度均大于80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例，用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。

 
【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】
1.所獲得淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。
2.所獲得淋巴細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。
3.所獲得淋巴細(xì)胞的鑒定方法
A.流式細(xì)胞技術(shù)
B.免疫組化技術(shù)
C.原位雜交技術(shù)
D.PCR技術(shù)
注：上述技術(shù)方案詳情請(qǐng)登陸上海研謹(jǐn)生物公司搜索細(xì)胞分離、
純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊(cè)”，并在說明書項(xiàng)目欄下下載使用。
【可能存在的問題及解決方法】
1.由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示：

2.本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心，其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地
區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對(duì)離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，恒定離
心時(shí)間，對(duì)離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。
3.本分離液依照標(biāo)準(zhǔn)，全部使用藥用級(jí)原料，性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同，可
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況，可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注：在對(duì)離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí)，離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g為基數(shù)，直至達(dá)到分離效果，
離心力zui小不得小于 400g，zui大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min為準(zhǔn)。