波多野结衣 黑人丨亚洲va国产日韩欧美精品色婷婷丨国产爽爽久久影院潘金莲丨国产玉足脚交欧美一区二区丨欧美一区二区在线丨日本免费一区二区三区激情视频丨欧美大片免费观看在线观看网站推荐丨一个本道久久综合久久88丨国产精品美女久久久久久2021丨亚洲中文欧美在线视频丨国产亚洲精品麻豆一区二区丨精品xxxxx丨人妻夜夜爽天天爽一区二区丨在线爽丨97在线成人国产在线视频丨久久22丨久久91丨农村少妇野战做爰全过程丨日韩久久免费丨秋霞无码久久久精品丨久久艹中文字幕丨懂色av一区二区三区免费看丨日本人妻巨大乳挤奶水丨中文字幕日本精品一区二区三区丨国产三级在线观看播放

鼠Streptavidin-HRP試劑盒（帶DAB顯色液）說明書

     SPMouseHRPKit（DAB）

     鼠Streptavidin-HRP試劑盒（帶DAB顯色液）

     

Cat.No.K2068

保存：2-8℃

組分說明

Cat.No.                                                                        K2068     K2068A

KitSize                                                                         3ml       18ml

內源性過氧化物酶封閉液（試劑1，白色液體）           3ml       18ml

封閉用正常羊血清工作液（試劑2，白色液體）           3ml       18ml

生物素標記羊抗鼠二抗工作液（試劑3，黃色液體）   3ml       18ml

HRP標記的鏈霉親和素（試劑4，紅色液體）                3ml             18ml

DAB-A液（20×）                                                        250μl         1ml

DAB-B液（1×）                                                          5ml             20ml

*本試劑盒僅適用于一抗為鼠源抗體的IHC實驗

     產品簡介

      本試劑盒根據生物素（Biotin）與鏈霉親和素（Streptavidin）具有強親和力的原理設計。在鼠源的一抗與相應的靶抗原結合后，本試劑盒中的生物素標記羊抗鼠二抗與一抗特異結合；二抗上標記的生物素與標記過氧化物酶（HRP）的鏈霉親和素結合，形成抗原～特異性一抗～生物素化的二抗～HRP標記的鏈霉親和素復合物。HRP可以催化底物顯色，從而推斷待檢抗原的存在及分布。該試劑盒使用的生物素化二抗、SA-HRP，均采用優化的標記和純化技術，使得其染色有更高靈敏度和更低的背景，適合于檢測福爾馬林固定石蠟包埋組織切片，以及冰凍切片、細胞爬片、新鮮制備的血涂片等。鼠Strept-avidin-HRP試劑盒適合與上海研謹生物即用型或濃縮型抗體配套使用。

     注意事項

     1.  以每張切片加入1滴（約50μl）計算，3ml可做60張切片，18ml可做360張切片。

     2.  對于內源性生物素含量比較豐富的組織，使用本試劑盒時最好用內源性生物素阻斷劑進行封閉。

     3.  DAB工作液現配現用，配制好的工作液2-8°C避光1小時內有效。

    實4.驗過程中避免組織片干燥，因此各步孵育時工作液用量必需充足，保證*覆蓋組織樣本，且盡量在濕盒中進行孵育。

    為5.獲得最佳實驗結果，請務必優化實驗條件及試劑用量。

     6.  DAB為可疑致癌物，使用時請采取必要的防護措施。

     7.  本產品僅用于科研，不能用于人體反應或人體治療。  

使用方法

1.  常規處理欲檢測的石蠟或冰凍組織切片或細胞爬片等樣本。

1）組織切片或細胞爬片染色前處理：

a.石蠟切片

 脫蠟水化：60oC烤片1小時，二甲苯脫蠟二次，每次5分鐘；再依次浸入梯度乙醇（無水乙醇－無水乙醇－95% －85%－75%乙醇）和蒸餾水中各5分鐘水化。

b.冰凍切片和細胞爬片

 切片（或爬片）浸于0.01MpH7.4PBS洗滌3次×5分鐘。然后用0.1%TritonX-100覆蓋組織（或細胞）浸潤15分鐘，0.01MpH7.4PBS洗滌2次×5分鐘。

2）石蠟切片的抗原修復：絕大大多數情況下，石蠟組織切片用檸檬酸緩沖液高壓修復都是適合的。

   修復工作液配制：1L去離子水中加入10ml檸檬酸緩沖液（IHC抗原修復液,100×)（Cat#：YJ0128），混勻即可。

   修復過程：修復液加入高壓鍋內，待修復切片浸于修復液中（必需沒過組織），蓋上壓力鍋蓋，加熱至均勻噴汽，從噴汽開始計時，1~2分鐘后壓力鍋離開熱源，自然冷卻至室溫，取出切片，蒸餾水淋洗后，再用PBS（0.01MpH7.4）漂洗2次，每次3分鐘。

2.滴加適量試劑1（內源性過氧化物酶封閉液），室溫孵育10分鐘，PBS充分淋洗。

3.滴加適量試劑2（封閉用正常羊血清工作液），室溫孵育10分鐘，甩干。

4.滴加適量一抗工作液（商品化即用型抗體或適當比例稀釋的濃縮抗體），按實驗要求孵育，然后PBS充分淋洗。

5.滴加適量試劑3（生物素標記羊抗鼠二抗工作液），室溫孵育10分鐘，PBS充分淋洗。

6.滴加適量試劑4（HRP標記的鏈霉親和素），室溫孵育10分鐘，PBS充分淋洗。

7.DAB顯色工作液配制：根據需要量，將試劑A和試劑B以1：19的體積比混勻后即為DAB顯色工作液。也可選擇每 毫升試劑B中滴加1滴（約50μl）試劑A，混勻即可。

8.顯色：加適量的DAB顯色工作液于需要顯色的組織切片或細胞爬片上即可顯色，顯色時間一般為1~5分鐘。顯微鏡下觀察控制顯色時間，當達到最佳顯色效果后，自來水沖洗終止顯色。顯色后的切片經復染、脫水透明，封片后可長期保存。

 

實驗代做服務：